









ELISPOT实验设备(ELISPOT)的原理是什么呢
(一)原理:细胞受到刺激后局部产生细胞因子,被PVDF膜上特异性单clone Antibody捕获。细胞分解后,再与生物素标记的二抗结合,其后再与碱性磷酸酶标记的亲和素结合。BCIP/NBT底物孵育后,PVDF膜出现“紫色”的斑点为阳性反应。
(二)ELISPOT与ELISA的区别
1.ELISA通过显色反应,在Microplate reader上测定吸光度,ELISPOT实验设备报价,与标准曲线比较得出可溶性蛋白总量。
2.ELISPOT通过显色反应,在细胞分泌这种可溶性蛋白的相应位置上显现清晰可辨的斑点,ELISPOT实验设备价格,可直接在显微镜下或通过仪器对斑点进行计数,1个斑点代表1个细胞,从而计算出分泌该蛋白的细胞的频率。
3.由于是单细胞水平检测,ELISPOT比ELISA和有限稀释法等更灵敏,能从20万~30万个细胞中检出1个分泌该蛋白的细胞。
4.捕获Antibody为高亲和力、高特异性和低内toxin McAb,在研究者以刺激剂activation细胞时,不会影响活化细胞分泌细胞因子。
ELISPOT实验设备实验步骤与原理示意 (示意图如下)
大致原理上分为如下7个步骤,详情已具体产品说明书为准
Step.1 包被:将单clone捕获Antibody添加到乙醇处理的PVDF膜板上
Step.2 细胞孵育:在有刺激的情况下加入细胞,孵育,细胞分泌细胞因子
Step.3 捕获分泌物:activation后的细胞,分泌的细胞因子被周围的Antibody结合捕获
Step.4 检测Antibody:去除细胞,清洗平板,加入生物素化的检测Antibody
Step.5 链霉亲和素-酶偶联物:加入链霉亲和素偶联物,保证后续在膜上形成斑点
Step.6 加反应底物:当酶催化时,显色底物形成不溶性沉淀
Step.7 结果分析:在自动点阅读器中对结果进行分析。每个斑点对应一个分析物分泌细胞
可见光ELISPOT实验设备
无荧光:7000-E(96和384孔板)、7000-V(384到6孔板和培养碟)
荧光:7000-F(384和96孔板)、7000 –Fzi(35mm到100mm培养皿,6到384孔板)
Bioreader-7000-V
384孔–6孔板和Petridishes培养碟的无氟应用。
BIOREADER-7000-V配备有全自动固定镜头更换器。
384至6孔之间的孔,ELISPOT实验设备,以及35毫米至1000毫米的Petridishes培养皿井眼可视化。
可提供焦点为100-2000 μ或噬菌斑100-5000 μ,细胞克龙50-2000 μ及更高的分辨率。
Bioreader-7000-V Alpha:适用于96 + 24/12孔。
Beta适用于384 / 96、48 / 24/12和6孔。
Gamma适用于384 / 96、48 / 24/12和6孔多孔板和培养皿。
BIOREADER 7000 -F
用于96孔荧光酶联免已斑点检测(Fluoro Elispot) /牙菌斑(Plaque) +酶表仪,具有创新的功率LED荧光激发。
BIOREADER7000 -F-z-i
多功能,倒置高分辨率放大
荧光/ VIS读取器,微+宏模式,ELISPOT实验设备哪家好,具有创新的功率LED荧光激发。
Versatile, Inverted high resolution Zoom
Fluoro/VIS reader, micro + macro mode with innovative
power LED fluoro excitation.
BIOREADER7000 -F-z-i特别适用于分析悬浮细胞和贴壁细胞中的Living cells。
这款Bioreader7000 -F z i提供了自动变焦范围,可实现35 mm -100 mm Petridish和6-384孔板全视野。
提供的分辨率为焦点30-2000 μ或噬菌斑100-5000 μ,细胞克龙50-2000 μ或更多。
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