胞外囊泡NTA检测-科锐诺生物

透射电镜作为鉴定外泌体的金标准，一直是科锐诺生物主营的业务之一。透射电镜点分辨率可以达到0.1nm，非常适合用来观察外泌体类囊泡。客户只需要寄送新鲜或者冻存的外泌体样品，我们负责从制片到观察的全套检测服务。一个样品提供2个放大倍数，10-15张照片。检测周期为7个工作日。

　　在透射电镜基础上，用外泌体标记蛋白对外泌体进行免1疫标记，利用胶体金标记出外泌体表面的特定抗原的位置。结合透射电镜形态学定性的特点，同时确定外泌体标记蛋白的位置。这样同时从形态学及免1疫学原理上验证外泌体。这样数据结果中既可以获得经典形态的外泌体，又可以定性及定位外泌体表面的标志蛋白。这样具有更充分的说服力。

据国际细胞外囊泡学会（ISEV）在2014年的提议，胞外囊泡NTA检测，外泌体鉴定3个标志：透射电镜（transmission electron microscope，TEM）、粒径（Nanoparticle Tracking Analysis， NTA）、蛋白标志物（Western Blot， WB）。

外泌体透射电镜TEM鉴定外泌体大小、形态，判断样本是否含有外泌体。

外泌体透射电镜分辨率为0.1~0.2nm，适合外泌体双层囊膜超微结构观察，可观测样本中是否存在外泌体样结构（通常为茶托型或一侧凹陷的半球形），同时可测量外泌体大小。

检测平台：TecnaiTM G2 Spirit BioTWIN

检测结果：三张透射电镜图片，尽可能体现完整的外泌体形态（如有）

检测周期：10-15个工作日

样本准备

1. 提供外泌体悬液即可，未纯化样本也可以上机检测；

注意：NTA仅提供粒径分布情况和颗粒浓度，无法区分外泌体与非外泌体成分；当然也可先利用外泌体特异性标记物进行荧光标记，则可以获知外泌体特定亚群的含量。

2.仪器的检测区间是10^7 particles/ml，且有浓度检测下限，为10^5 particles/ml，进样量不少于2ml；一般来说，会对样本稀释后进样；

我司无法准确建议送样量；检测需要量与样本本身浓度有关，样本浓，则用量小，反之则多，根据检测经验，样本取用量一般在2μl-100μl不等，取用量大于50μl时大多由于样本分泌量过低、提取失败或者对样本有过多稀释。一般建议送样量不低于30μl，如样本珍贵，可联系我司寄回，运费视具体情况收取。