科锐诺生物科技-植物硬组织切片服务

石蜡包埋切片实验基本步骤主要有以下几步：

1、取材：新鲜组织固定于4%多聚甲醛24h以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整，将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内。

2、脱水：将脱水盒放进吊篮里于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-无水乙醇I 30min-无水乙醇II 30min-醇苯5-10min-I5-10min-II5-10min-蜡I1h-蜡II1h-蜡III 1h。

3、包埋：将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入包埋框，待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。于-20°冻台冷却，蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。

4、切片：将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片，片厚4μm。切片漂浮于摊片机40℃温水上将组织展平，用载玻片将组织捞起，植物硬组织切片服务，并放进60℃烘箱内烤片。待水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。

甲1苯1胺蓝染色原理：甲1苯1胺蓝是一种常用的人工合成染料，属于醌亚1胺染料类。这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。甲1苯1胺蓝中的阳离子有染色作用，组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲1苯1胺蓝不仅含有两个发色团，还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类，帮助发色团对组织产生染色力，使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。甲1苯1胺蓝染色液由于硼酸盐缓冲液呈强碱性，更利于组织细胞的着色。

叶片内分布着大小不同的叶脉，沿着叶片中央纵轴有一条很明显的叶脉称为主脉，其余的叶脉称为侧脉。双子叶植物由主脉向两侧发出许多侧脉，侧脉再分出细脉，侧脉和细脉彼此交叉形成网状，称为网状脉；单子叶植物的主脉明显，侧脉由基部发出直达叶尖，各叶脉平行，称为平行脉。一些低等的被子植物、蕨类植物和裸子植物叶脉作二叉分枝，形成叉状脉，是比较原始的叶脉。

叶片又可以分为叶尖、叶基、叶缘等部分，每种植物叶片的形态特征可作为识别植物的依据之一。

石蜡包埋呢是现在病理技术中很常规的一种服务项目，而石蜡包埋的实验目的就是掌握石蜡包埋实验技术；理解组织脱水、透明及浸蜡原理；熟悉不同组织的结构特点。

而石蜡包埋实验需要用到的主要试剂有：0.85%生理盐水，75%酒精，85%酒精，95%酒精，溶液，无水乙醇，48℃-60℃的石蜡。

有人注意到石蜡包埋会使用反复用过的石蜡，这是因为石蜡在刚出厂时其密度比较疏松，经过反复多次融化和冷却后的石蜡密度会增加，可以更贴近包埋组织的密度以及硬度，在进行包埋组织时不易造成蜡块的脱裂。所以一般在使用新蜡之前会在熬一下。