预杂交
1）每个管中置换成大约300ulHYB－溶液，60℃水浴5分钟，染色体荧光原位杂交，避免振荡。
2）用等体积的HYB＋取代HYB－。
3）60℃水浴，染色体原位杂交，预杂交4小时以上。
杂交
1）吸去预杂交的HYB＋，加上100ul已加入探针的HYB＋溶液（探针浓度约为1ng/ul）..
2）60℃ 温浴过夜。
注：杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等，原位杂交，温度越低，探针结合越好，温度越高，背景越小。
原位杂交是一种生物学技术，它可以在细胞或组织中特定部位检测DNA或RNA的存在，原位杂交检测，而不需要将DNA或RNA分离出来。这项技术使用标记的DNA或RNA探针，与细胞或组织中的相应DNA或RNA进行特异性结合，然后通过光学显微镜或电子显微镜观察探针的位置和数量。
原位杂交的原理很简单。DNA或RNA分子具有互补的核苷酸序列，因此可以通过氢键相互结合。将标记的DNA或RNA探针与细胞中的DNA或RNA进行杂交，可以特异性地检测这些探针的位置和数量。探针的数量和位置可以反映DNA或RNA在细胞中的水平和分布。
原位杂交技术的实验结果
原位杂交技术的实验结果包括阳性信号和阴性信号的判断标准。阳性信号是指探针与目标核酸序列特异性结合形成的双链复合物，在显色反应、荧光染色或性同位素标记下呈现出明显的信号。阴性信号是指探针未与目标核酸序列结合，不呈现任何信号。实验结果的分析需要结合探针的特异性和敏感性、组织或细胞的原始结构以及实验条件等因素综合进行。
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