亚细胞定位即指某种生物大分子物质或脂类在细胞内存在的具体位置。蛋白质在细胞质中经过翻译并合成，由蛋白质分选信号引导而被转运到特定的亚细胞结构中以参与细胞的各种生命活动，这一过程称为蛋白质亚细胞定位。蛋白质的功能、代谢以及相互作用等都与其亚细胞定位密切相关，成熟蛋白质必须在特定的亚细胞结构中才能发挥正确稳定的生物学功能，如果定位发生偏差，荧光定量，将对细胞功能甚至生命产生重大影响，因此对蛋白质亚细胞定位的研究具有重要意义。
双分子荧光互补（Bimolecular Fluorescence Complementation，BiFC）是一种用于研究蛋白质-蛋白质相互作用的强大技术。它利用荧光蛋白的特性，将两个不同的荧光蛋白片段（通常是黄色荧光蛋白和绿色荧光蛋白）分别与两个不同的蛋白质结合，以检测它们之间的相互作用。
BiFC的原理是基于荧光蛋白的特性，这些荧光蛋白可以发射出特定的光子，从而在细胞中产生荧光信号。当两个不同的荧光蛋白片段结合在一起时，它们会形成一个完整的荧光蛋白，并发出更强的荧光信号。因此，通过观察荧光信号的强度和分布，我们可以推断出两个蛋白质是否相互作用以及相互作用的确切位置。
基因法转化洋葱表皮细胞：
分别用70%乙醇和灭菌蒸馏水清洗金粉（直径为1 μm），加入灭菌蒸馏水制成金粉悬浮液，取100 μL 放在含有1.0 cm2 洋葱表皮的玻璃皿中，边振荡边加入10 μL pCambia2301-GaMYB2-GFP质粒，逐步加入40 μL 0.1 mol·L-1 亚精胺和100 μL2.5 mol·L-1 CaCl2，振荡混匀。基因GDS-80轰击时氦气罐的气压为1 300 psi，取10 μL DNA 包裹好的微粒悬浮液加到基因中央，进行轰击，之后放置25℃避光过夜培养，使用ConfocalLaser激光共聚焦显微镜观察。
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