






植物外泌体检测的功能,主要是鉴定它是什么、有什么活性、能不能用,分成基础鉴定功能和应用验证功能两大类。
一、基础鉴定功能(判断 “是不是、纯不纯”)
确认是植物外泌体
看形态:双层膜、30–150 nm 纳米颗粒
看粒径与浓度:NTA/DLS 测大小、数量
看标志物:植物膜蛋白、小 RNA、特征脂质
评估纯度与质量
排除多糖、多酚、细胞壁碎片、叶绿体 / 线粒体污染
计算颗粒 / 蛋白比,判断纯化效果
验证膜完整性(破膜实验)
稳定性检测
不同温度、pH、冻融循环下粒径、浓度、结构变化
为储存、制剂、工艺提供依据

此外,外泌体检测服务,动态光散射(DLS)适用于均一样品的快速初步粒径评估,操作简便,但对大颗粒敏感、重复性有限;纳米库尔特技术可提供外泌体的颗粒浓度,但受检测范围限制;分析型离心(AUC)在评估样本纯度方面具有优势,可通过沉降行为与紫外吸收区分外泌体与杂质,但通量较低。研究表明,单一技术不足以表征外泌体,整合多种技术进行正交验证,才能建立的外泌体表征体系。

免疫电镜(Immuno-TEM)结合胶体金标记的特异性,定位外泌体表面 / 内部蛋白(如 CD63、CD81、TSG101),用于外泌体亚群鉴定与功能验证。
关键问题与质控
背景过深 / 颗粒聚集:多为染色时间过长、样品浓度过高或盐未洗净;优化染色时长、稀释样品、增加超纯水漂洗步骤。
无典型膜结构:可能是蛋白聚集体或脂蛋白;结合 NTA 粒径分析、Western blot(检测外泌体标志蛋白)联合鉴定。
重复性:需拍摄 10 个以上不同视野,统计粒径分布与形态比例。
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