外泌体检测技术-贝科新肽科技公司

传统疾病诊断方法（如组织病理活检）多具有侵入性，外泌体检测技术，存在风险高、取样不便、无法实时监测等局限，而液体活检凭借微创、便捷、可重复取样的优势，成为临床诊断的重要发展方向。外泌体作为液体活检的标志物之一，其检测的临床意义主要体现在三个方面：疾病早期诊断，外泌体中携带的特异性生物标志物可在疾病早期（甚至临床症状出现前）发生异常表达

外泌体电镜的标准操作流程：

样品制备（超离后/色谱后样本的稀释、上样技巧）。

负染步骤详解（醋酸双氧铀 vs. 磷钨酸的选择、浓度、时间、注意事项）。

制样常见陷阱（如何避免“盐结晶”、样品聚集、染色沉淀）。

关键图谱解读与陷阱分析：

外泌体的典型形态（“杯状结构”的成因与争议）。

如何区分外泌体、微囊泡、脂蛋白、蛋白聚合物。

常见假象（箭头指向关键特征，解释其成因）。

生化标志物（蛋白 / 核酸 / 脂质）

蛋白标志物：

植物特有：TET8、PEN1、SYP121、HSP70等膜转运 / 热激蛋白。

通用：CD63/CD9/TSG101交叉反应弱，不推荐；优先 WB + 质谱。

核酸：小 RNA 测序、qPCR 检测 miRNA/sRNA；外泌体富集特定 RNA。

脂质：磷脂、鞘脂、胆固醇；质谱分析脂质组。

二、纯度与完整性检测

BCA+NTA：计算粒子 / 蛋白比（particles/mg），比值越高纯度越好。

Triton X?100 破膜实验：验证膜结构完整性；破膜后 NTA 颗粒数显著下降。

排除污染：检测叶绿体 / 线粒体标志物、多糖、多酚、果胶（植物样本易污染）。

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