外泌体电镜是纳米级外泌体（直径通常 30–150 nm）形态鉴定与结构分析的技术，主流为透射电镜（TEM，含负染、超薄切片）、冷冻透射电镜（Cryo-TEM），辅以扫描电镜（SEM）和电子断层扫描（ET），是外泌体 “金标准” 鉴定方法之一（常与 NTA、Western blot 联用）。
常用技术与流程
负染 TEM（常规）
原理：用 2% 磷钨酸（PTA，pH 6.5–7.0）或醋酸双氧铀染背景，样品本身不被强染，形成亮边暗中心的反差，清晰显示双层膜与杯状 / 茶托形态。
流程：碳支持膜铜网滴样（5–10 μL，静置 10 min 吸附）→ 滤纸侧吸余液 → 负染 1–2 min → 吸干晾干 → 80–120 kV、50k–100k 倍观察。
优点：快速、成本低、样品需求量小；缺点：化学染色可能轻微改变结构，盐结晶易干扰。
值得关注的是，原位外泌体检测技术的兴起，打破了传统检测需裂解外泌体的局限，可直接对完整外泌体内的核酸进行分析，减少样本处理步骤，降低核酸丢失与降解的风险，为液体活检技术的升级提供了新路径，其在诊断与个性化中的转化潜力备受关注。同时，外泌体WB测试，单外泌体分析技术（如基于SPR的微流控技术）可解析外泌体的异质性，为异质性研究提供了新工具。
扫描电子显微镜与TEM的区别在于，其电子束不穿透样品，而是通过电子束在样品表面进行扫描，电子与样品表面的原子发生相互作用，产生二次电子、背散射电子等信号，这些信号经探测器收集、放大后，在成像屏幕上形成样品的三维表面形貌图像。SEM的分辨率通常为1~10 nm，虽然低于TEM，但能够清晰呈现外泌体的表面形貌、大小及分布状态，同时还能观察外泌体与载体表面或的相互作用，为外泌体的表面特征研究提供支持。
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