生化标志物（蛋白 / 核酸 / 脂质）
蛋白标志物：
植物特有：TET8、PEN1、SYP121、HSP70等膜转运 / 热激蛋白。
通用：CD63/CD9/TSG101交叉反应弱，外泌体检测服务，不推荐；优先 WB + 质谱。
核酸：小 RNA 测序、qPCR 检测 miRNA/sRNA；外泌体富集特定 RNA。
脂质：磷脂、鞘脂、胆固醇；质谱分析脂质组。
二、纯度与完整性检测
BCA+NTA：计算粒子 / 蛋白比（particles/mg），比值越高纯度越好。
Triton X?100 破膜实验：验证膜结构完整性；破膜后 NTA 颗粒数显著下降。
排除污染：检测叶绿体 / 线粒体标志物、多糖、多酚、果胶（植物样本易污染）。
射电子显微镜是外泌体研究中常用、成熟的电镜技术，其原理是利用加速后的电子束穿透样品，电子与样品中的原子发生相互作用（如散射、吸收、衍射），形成不同强度的电子信号，这些信号经物镜、中间镜、投影镜等光学系统放大后，在荧光屏或成像探测器上形成样品的超微结构图像。TEM的分辨率极高，常规TEM的分辨率可达到0.2 nm左右，能够清晰呈现外泌体的脂质双层膜、内部结构及表面细节，是外泌体形态学鉴定的“金标准”。
与传统TEM相比，Cryo-TEM无需进行固定、脱水、染色等处理，样品直接在冷冻状态下进行观察，能够地保留外泌体的天然形态和结构，反映外泌体在体内的真实状态。此外，Cryo-TEM还可以结合电子断层扫描技术，实现外泌体三维结构的重构，进一步深入了解外泌体的空间形态和内部成分分布，为外泌体的结构与功能研究提供更强大的技术支撑——冷冻电子断层扫描（Cryo-ET）结合了冷冻固定技术和电子断层扫描技术，能够在接近天然状态下重构外泌体的3D结构，分辨率可达1~2 nm，是研究外泌体空间结构的重要工具。
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