生化标志物（蛋白 / 核酸 / 脂质）
蛋白标志物：
植物特有：TET8、PEN1、SYP121、HSP70等膜转运 / 热激蛋白。
通用：CD63/CD9/TSG101交叉反应弱，不推荐；优先 WB + 质谱。
核酸：小 RNA 测序、qPCR 检测 miRNA/sRNA；外泌体富集特定 RNA。
脂质：磷脂、鞘脂、胆固醇；质谱分析脂质组。
二、纯度与完整性检测
BCA+NTA：计算粒子 / 蛋白比（particles/mg），比值越高纯度越好。
Triton X?100 破膜实验：验证膜结构完整性；破膜后 NTA 颗粒数显著下降。
排除污染：检测叶绿体 / 线粒体标志物、多糖、多酚、果胶（植物样本易污染）。
植物外泌体（植物源外泌体样纳米颗粒，PELNs）检测以形态、粒径、浓度、生化组成、纯度为，优先用TEM+NTA+WB / 质谱组合鉴定，再做功能与质控检测。
一、鉴定三要素（ISEV 标准）
1. 形态学观察（TEM/SEM/AFM）
透射电镜（TEM）：金标准，可见双层膜、杯状 / 茶托状、近球形结构，粒径 30–150 nm。
扫描电镜（SEM）：看表面形貌与分散性。
原子力显微镜（AFM）：测三维形貌与膜厚度。
2. 粒径与浓度（NTA/DLS）
纳米颗粒跟踪分析（NTA）：单颗粒，外泌体检测服务，给出粒径分布（30–150 nm 为主）、浓度、多分散性，适合复杂样本。
动态光散射（DLS）：测平均粒径与 PDI，适合单分散体系，不能替代 NTA。
合格参考：主峰 30–150 nm，浓度≥1×10? particles/mL。
外泌体的生成是一个复杂的细胞内过程，主要涉及内吞、多囊泡体形成及释放三个关键步骤。首先，细胞通过内吞作用将胞外物质或细胞膜成分摄入细胞内，形成早期内体；随后，早期内体的膜结构发生内陷，形成包含多个小囊泡的多囊泡体（Multivesicular Bodies， MVBs）；后，多囊泡体与细胞膜融合，将其内部的小囊泡释放到细胞外，这些被释放的小囊泡即为外泌体。
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